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長度?內徑?膜厚?氣相色譜柱該根據什么選?
更新時間:2026-09-03   點擊次數:23次

01 柱長



● 柱長主要影響三個重要參數:柱效、保留值(分析時間)和載氣壓力。

1. 柱效(通常用理論塔板數N或每米塔板數N/m表示)與柱長成正比。分離度是每米塔板數的平方根函數。例如,將柱長加倍,理論上將提高分離度1.41倍。柱長通常有15m、30m、50m、60m等。

• 15m柱:用于快速篩選簡單混合物或分子量高的化合物。

• 30m柱:是普遍的柱長。

• 50、60m柱:用于較為復雜的樣品。如果希望得到較高的柱效,獲得窄又尖銳的峰形時,建議使用長柱。

2. 待測物保留值與柱長成反比。恒溫條件下尤為顯著,即使程序升溫條件下由于運行時間的差異也可能會比較明顯,增加柱長確實有利于增加柱效,但分析時間也會相應增加。

3. 柱頭壓力幾乎與柱長成正比。色譜柱流失將隨著柱長的增加而增加。較長的色譜柱的固定相較多,因此會產生相對較多的降解產物,產生稍大的流失,但不會影響長柱的選擇及使用。色譜柱成本與柱長直接相關,柱長加倍也幾乎會使色譜柱的價格加倍。當通過增加柱長實現增加柱效時,色譜柱成本也顯著增加,同時分析時間也會延長。


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色譜柱柱長的選擇:

1. 如果不知道最佳長度:可先使用25~30m長的色譜柱。

2. 含易分離組分的樣品或含待測組分和其他組分較少的樣品:可使用10~15m長的色譜柱。內徑較小的色譜柱通常長度較短,以便降低柱頭壓力。 

3. 如果通過其它方法(降低內徑、改變固定相、增加膜厚、改變溫度程序等)無法達到滿意的分離度時:可使用50~60m長的色譜柱。這種色譜柱適用于分離含多組分的復雜樣品,但分析時間較長,費用較高。

例如:GB 5009.168-2016食品安全國家標準 食品中脂肪酸的測定;GB 5009.257-2016 食品安全國家標準 食品中反式脂肪酸的測定。由于脂肪酸種類較多,且有不少順反異構體,針對這些較復雜的樣品,標準建議使用100米的強極性色譜柱。


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02 內徑

● 色譜柱內徑主要影響的五個參數是:柱效、保留值、壓力、載氣流速和柱容量。

1. 柱效(N/m)與色譜柱內徑成反比。色譜柱直徑越小,則每米理論塔板數就越高。分離度是理論塔板數的平方根函數。因此,如果把柱效加倍,理論上能把分離度增加約1.41倍,實際上增加的倍數或為1.2~1.3倍。在需要得到窄峰和高柱效時,建議使用內徑較小的色譜柱。

2. 保留值與色譜柱內徑成反比(相同長度及膜厚),內徑變小會其保留值增大,不過一般不會根據保留值選擇色譜柱內徑。而實質上由于內徑變小,柱效隨之增加,改善了分離度,通過選擇合適長度柱子,讓同樣的分離工作會在更短時間內完成。

3. 色譜柱柱頭壓力大約是色譜柱內半徑的負二次方函數。例如,內徑為0.25mm的色譜柱需要的柱頭壓力是相同長度(載氣和溫度也相同)內徑為0.32mm柱頭壓力的1.7倍,即相同條件時更小內徑的色譜柱需要的壓力更高。

4. 常壓下,載氣流速隨著色譜柱內徑的增大而加快。對于需要高流速的方法或硬件,通常使用較大內徑的色譜柱。為了正常運行,頂空進樣系統和吹掃捕集系統需要更高的載氣流速。所以通常選擇內徑為0.45mm或0.53mm的色譜柱與這些系統一起使用。對于需要低載氣流速的方法或硬件,通常使用較小內徑的色譜柱。GC-MS是需要低載氣流速的典型系統,因此,通常選用內徑不大于0.25mm的色譜柱用于GC-MS系統。

5. 色譜柱容量隨著色譜柱內徑的增大而增加。實際色譜柱容量也取決于固定相、溶質性質和膜厚。

色譜柱內徑的選擇:

1. 如果需要較高的柱效:可使用0.18~0.25mm內徑的色譜柱。但內徑較小的色譜柱容量較小,并需要較高的柱頭壓。

2. 如果需要較大的樣品容量:可使用0.32mm內徑的色譜柱。與0.25mm內徑的色譜柱相比,這種色譜柱通常對不分流進樣或體積(>2μL)進樣時較早流出的組分有更佳的分離度。

3. 只有在儀器配備大口徑直接進樣器,且要求柱效較高時:才使用0.45mm及以上內徑的色譜柱。尤其是高載氣流速的情況,如吹掃捕集、頂空進樣器和閥進樣,大內徑色譜柱特別適用。

03 膜厚

● 色譜柱膜厚主要影響五個參數:保留、分離度、流失、惰性和容量。

1. 恒溫條件下,待測物質的保留與膜厚成正比。程序升溫的條件下,待測物質的保留是恒溫條件下的1/3~1/2;對于較易揮發的物質,液膜較厚的色譜柱可以得到更強的保留。

液膜較厚的色譜柱通常用于揮發性化合物,如溶劑和一些氣體的分析。液膜較薄的色譜柱用來減弱保留能力強的物質的保留,以便其可以更快或在更低的溫度下流出。液膜較薄的色譜柱通常用于較難揮發、高沸點、高分子量的化合物的分析。

2. 由于色譜柱的保留不足,因此保留因子(K值)小于2的物質難以分離。由于物質保留的增強,改用液膜較厚的色譜柱會使其分離度更高。

分離度的提高幅度取決于在原來色譜柱上物質K值,更換液膜較厚的色譜柱后,若將K值調整到2-10之間,會對提高分離度比較有效。對于K值大于10的峰,增加其保留通常不會改善其分離度,有時還會損失分離度。因為此時若增加膜厚改進較早流出峰的分離度,但可能導致較晚流出峰的分離度的損失。

3. 對于給定的固定相,色譜柱的流失將隨著膜厚的增加而增加。由于流失嚴重,因此液膜較厚的色譜柱的溫度上限可能會較低。

由于物質在液膜較厚的色譜柱有更強的保留,因此增加膜厚時,在此色譜柱較晚流出峰的物質可能轉移到流失較高的區域,影響其檢測靈敏度,從而出現不易定量及定量不準情況,尤其在痕量分析中影響尤為明顯,所以需在保證分離度,對稱因子等參數滿足分析要求的前提下,選擇更為合適的膜厚。

4. 液膜較厚的色譜柱更具惰性。不易于和待測物質發生作用(吸附或化學反應),因為有更多固定相來保護待分析物不受色譜柱管線表面的干擾。

5. 液膜較厚的色譜柱的容量較高,也就是能耐受更高的載樣量。當一種待測物含量過高時,所導致的峰展寬/峰前延/峰拖尾可能干擾鄰近的峰或與其共流出,此時改用液膜較厚的色譜柱有助于解決上述問題。

色譜柱膜厚的選擇:

1. 厚膜色譜柱適用于揮發性物質(如殘留溶劑、氣體)的分離和增強其保留。厚液膜色譜柱惰性更強,容量更大,但厚液膜色譜柱具有較高流失性,使用溫度上限也有所降低。

2. 薄膜色譜柱適用于高沸點、高分子量、難揮發物質(如類固醇、甘油三酸酯),有助于盡量減小保留時間。薄膜色譜柱流失性較低,但薄液膜色譜柱惰性更弱、容量更小。

例如:SN/T 4895-2017食品接觸材料紙和紙板食品模擬物中礦物油的測定,由于礦物油沸點較高,厚膜較厚的色譜柱會有較大的流失,因此建議使用0.1μm膜厚的色譜柱。


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